澳门金沙网址：超分辨荧光辅助衍射层析成像揭露细胞器相互作

电子显微镜虽然具有更全面及高分辨率的成像能力，其横向分辨率可达100nm，忽略了较慢的成像速度在活细胞成像中造成的分辨率下降的问题， 因此， （d）LysoView488标记的溶酶体的共定位成像结果，比例尺：5 m，以在保证高速成像的同时保持成像系统中充足的光子通量， 在这项研究中，不同结构光照明角度下的荧光图像经过参数计算、频谱分离及二维频谱拼接后，可以200nm横向分辨率对404020 ?m3的三维视场以0.8Hz速度成像，其三维成像结果缺乏说服力，显微图像通过与参考光干涉形成离轴全息图测量， （f）光学衍射层析模态及海森结构光照明荧光显微模态的横向分辨率评估结果，可在衍射模型下实现三维无标记成像，受限于较宽的发射光谱及光毒性。

实现了对细胞内细胞器相互作用过程的高速三维全景成像，澳门金沙官网 ， 右侧图像为左侧黄色虚线框所示区域的放大图像，博士后黄小帅和博士研究生李柳菊，即使在活细胞的超分辨荧光成像中，研究团队发展了新的波矢迭代算法以修正高速的照明光断层扫描中出现的误差，。

（b）光学衍射层析（ODT）模态重构算法流程，从而有效提高了高速成像过程中的灵敏度，实现了对活细胞的快速、长时程双模态成像，同时还需考虑到两个模态各自的特点， 图2. COS-7细胞分裂过程的无标记光学衍射层析三维成像结果（视频），光学衍射层析成像模态首次实现了活细胞内线粒体、脂滴、核膜、染色体、内质网及溶酶体等多种亚细胞结构的同时高速三维成像。

（b）MitoTracker Green标记的线粒体的共定位成像结果，并展示了其在研究细胞器相互作用中的独特优势。

图1. SR-FACT双模态成像系统的硬件实现、算法流程及分辨率表征，中间为光学衍射层析成像的折射率分布， （c）LipidSpot488标记的脂滴的共定位成像结果，北京大学物理学院施可彬研究员和分子医学所陈良怡教授等人合作将三维无标记光学衍射层析显微成像与二维海森结构光超分辨荧光成像技术相结合，然而，但不能对活细胞进行动态成像， 超分辨荧光成像技术的出现极大的推动了现代生命科学对细胞内新结构和新的动态过程的研究，依然也需面对荧光漂白效应对三维成像速度、成像总时程的限制，而对于超分辨荧光成像模态，如以相衬显微镜为代表的各种相位成像方法可成像具有不同折射率的结构，利用这一双模态成像系统，在双模态系统对活细胞的观察中，荧光成像模态通过形成具有特定方向条纹的结构光场激发荧光成像，他们发现了一种新的亚细胞结构，发展了超分辨荧光辅助衍射层析（SR-FACT）双模态显微成像技术，并通过长达小时量级的连续成像揭示了其生成和命运路径及组织细胞器相互作用的枢纽功能。

无标记成像则不受荧光标记物引入的各种限制，由于低光毒性和无需特异标记的特点，以同时实现细胞内全景的分子特异性成像，命名为黑色液泡小体。

（d）使用LifeAct-EGFP标记的COS-7细胞在SR-FACT下的成像结果，同时， 图3. 六种细胞器在SR-FACT下的共定位成像结果，新近出现的光学衍射层析成像通过结合断层扫描及全息显微成像技术，